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Biologie et Physio cellulaire CONTRÔLE DU CYCLE CELLULAIRE Coupé G0: Gap 0 facultatif, phase de quiescence G1: Gap 1 croissance, métabolisme normal et duplicat ion des organites S: « synthetic » phase réplication de l'ADN (duplication des chromos omes) Interphase: G1, S, G2 (G = Growth) Des cultures de cellules asynchrones sont traitées par la colcémide, ou l'hydroxyurée, ce sont des inhibiteurs. Colcémide = inhibe la migration de chromosomes dans les ce llules filles (cellules coincées en mitose) Hydroxyurée = inhibe la réplication (cell coincées en début de phase S) Deux types de cellules sont alors obtenues: – cellules en fin de G1 qui ne peuvent pas rentrer en S – cellules bloquées en S Rendre l'ADN radioactif: ajouter de la thymidine tritiée, observer au microscope les 1ères cellules entrant en mitose qui auront incorporé la TT. Le temps des différentes étapes du cycle peut être calculé à l'aide de TT: – mitose 1h dans un cycle de 24h – G1 durée variable jusqu'à > 16h – S environ 8h – G2 environ 6h Lors de l'expérience, nous insé rons en premier de l'Hydroxyurée qui permet de bloquer les cellules en début de phase S.
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